遊戲開始前需要確定主角的名字，這裏就使用默認的Desmond。遊戲開始是一段關於前兩部《刺客信條》的回憶。動畫之後，古代的主角Ezio身處一場戰鬥之中。依據係統提示不斷按鼠標左鍵，攻擊敵人的首領。但是最後照舊會被他躲開。
Ezio騎著馬跟隨叔叔回故鄉的城鎮。
1499年12月 IL Vaticano
按WASD控製角色的移動。控製角色朝前走，在前麵金屬杖那邊會有動畫。平台降了下去，同時主角的叔叔出現。按E鍵進入EAGLE VISON，就可以看到發光的指示物。向下滑動鼠標，你會看到全部《兄弟會》四個區域的一張完全的輿圖。爬上去後按WASD來移動，向上爬刺客信條:兄弟會。
半路會從馬上跳下來，連續向炮台前進。按住鼠標右鍵可以跑動，按住SHIFT鍵可以推開路上的人群。
從屋子裏麵出來後會開始遇到敵人，按鼠標左鍵攻擊，按住鼠標右鍵進行格擋。
然後一路跟著Mario叔叔前進。
最後一個小任務是在城牆上，可以跳到屋頂上再爬到城牆上，或者議決任務點相近的梯子上去。注意從高處跳下是會少血的，跳進草堆中就沒事了。同時還需要幹掉路上出現的敵人。
動畫之後，上樓進主角本身的房間休息。
1500年1月 Monteriggioni
接著鏡頭會切換刺客信條:兄弟會。進入城裏後，來到主角的家中。
爬上去後，一路跟著叔叔前進。右下方的小地圖中會有3個感歎號的可接任務標記。一個任務是幫助婦女搬花，按E鍵對話。接著按Shift鍵搬起花之後跟著婦女到達指定地點。
第二個任務在城外，幫助找回馬匹。快速跑向馬匹，然後快速按Shift鍵上馬，接著騎馬歸去交任務。
按住鼠標右鍵和空格鍵可以快速跑動或跳躍，攀爬。和炮台邊的NPC對話後去藍色標記點的修理工對話後再回到炮台那裏。在修理好大炮後，按Shift鍵使用大炮。用鼠標控製準星然後按鼠標右鍵射擊。幹掉小地圖上表示的所有赤色標記點。
完成3個小任務後，回到家中與Caterina另有母親，妹妹見麵。按Shift鍵可以開門。
最後兩人爬上了河邊一幢房子的塔頂，然後跳入河中離開刺客信條:兄弟會。
第二天早上，小城受到敵人的攻擊。Eizo從家中出來騎上馬向綠色比標記的炮台騎去。
Ezio與妹妹相見後，需要先去完成3個小任務然後再回家。議決標記點的梯子那裏上去。
上去後使用大炮炸毀敵方的火炮。需要先後使用左右兩門大炮。
敵人的箭樓衝到的城牆邊，大量敵人湧到了城牆上。向右邊出現的敵人那裏跑過去，爬到箭樓上麵，依據提示換武器，然後按F鍵鎖定下麵的敵人，接著按鼠標左鍵跳下去殺死他刺客信條:兄弟會。
幹掉城牆上的所有敵人。這個game在我讀大一的日期見過，不過當時還不怎麼喜歡玩這樣典範的game，轉變我見解的是三國誌係列的三國誌九，今後一發不能摒擋。
從城牆上下來帶著同伴回家營救母親和妹妹，幹掉路上出現的敵人刺客信條:兄弟會。此時Ezio受了傷，以是血量上限會減少。
救了妹妹之後跟著她去救母親。然落伍入家中的密道逃離小城。
從城裏出來後，Ezio讓妹妹帶著母親前往佛羅倫薩，而本身騎馬前往羅馬，但是由於受傷而在中途落馬。第一章結束。
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